Ni Smart Beads 6FF是一种新型IMAC填料，螯合有非常牢固的Ni离子，具体性能见表1。Ni Smart Beads 6FF主要应用于分泌到真核培养液上清中的组氨酸标记蛋白的捕获和纯化，可以在含有EDTA及DTT的情况下进行目的蛋白高效的纯化。Ni Smart Beads 6FF有很强的组分兼容性，适用于广泛底物及盐浓度的缓冲条件，试剂耐受情况见表2。

表1. Ni Smart Beads 6FF产品性能

	Ni Smart Beads 6FF
基质	高度交联的6%琼脂糖微球
载量（/mL基质）	＞10mg 6XHis-tagged protein
微球粒径（μm）	45–165
最大压力	0.3 MPa, 3 bar
储存缓冲液	含20% 乙醇的1XPBS
储存温度	4°C-30°C

表2. Ni Smart Beads 6FF试剂耐受情况

试剂种类
0.01M HCl ,0.01M NaOH	一周
10mM EDTA,1M NaOH, 5mM DTT, 5mM TCEP, 20mM 巯基乙醇, 6M盐酸胍	24小时
500mM 咪唑，100mM EDTA	2小时
30%异丙醇	20分钟

2. 问题及解决方案

问题	原因分析	推荐解决方案
柱子反压过高	填料被堵塞	裂解液中含有微小的固体颗粒，建议上柱前使用滤膜（0.22或0.45μm）过滤，或者离心去除。
洗脱组分中没有目的蛋白	样品中无His标签蛋白	采用Western Blotting等确定样品中是否含有目的蛋白。
	表达量太低	优化表达条件。
	目的蛋白结合比较弱，在洗杂步骤被洗下来了	提高洗杂液的pH，或者降低咪唑浓度
	目的蛋白结合过强，不容易洗脱下来	降低洗脱液的pH值，或者增加洗脱液中咪唑浓度。
	蛋白降解	菌体破碎时添加一些蛋白酶抑制剂。
洗脱组分不纯（含有多种蛋白）	洗杂不彻底	增加洗杂液体积或提高洗杂液中咪唑浓度。
洗脱组分不纯（含有多种蛋白）	样品中含有其他的组氨酸标签蛋白	通过调节pH值，或者咪唑浓度来优化洗杂条件。再使用其他的纯化手段（如离子交换，疏水等）进一步纯化洗脱组分。
上样过程中蛋白发生沉淀	操作温度太低	室温下进行上样。
上样过程中蛋白发生沉淀	蛋白发生聚集	在样品和所有的缓冲液中添加稳定剂，如0.1%的Triton X-100 或者Tween-20。

3. 订购信息及相关产品

名称	货号	规格
Ni Smart Beads	SA035010	10mL
	SA035050	50mL
	SA035100	100mL
	SA035250	250mL
	SA035C	1L
Ni Smart Beads 6FF	SA036010	10mL
	SA036050	50mL
	SA036100	100mL
	SA036500	500mL
	SA036C	1L
HisCap Smart 6FF	SA036C11	1X1mL
	SA036C51	5x1mL
	SA036C15	1X5mL
	SA036C55	5X5mL
	SA036CS	3X1mL+1X5mL

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