GFP(绿色荧光蛋白)或其突变体EGFP(增强型绿色荧光蛋白)被广泛应用于检测基因表达效率以及目的蛋白的表达和分布。GFP作为标签蛋白，其融合目的蛋白自发荧光,不需要目的基因的抗体或杂交就能知道目的基因在细胞中的定位，其他物质干扰小。Anti-GFP Affinity Beads 4FF可以检测和纯化GFP、EGFP及其融合表达蛋白，不结合BFP标签蛋白。

表1. Anti-GFP Affinity Beads 4FF产品性能

指标	性能
基质	高度交联的4%琼脂糖微球
配体	Anti-GFP Antibody
载量	>1mg GFP标签蛋白/ml 介质
粒径 (μm)	45-165
最大流速	0.3 MPa, 3 bar
试剂耐受	Stable up to 80°C, 1mM DTT, 3M Guanidinium•HCl, 8M Urea, 2M NaCl, 2% Nonidet P40 Substitute, 1% SDS, 1% Triton X-100
储存缓冲液	20%乙醇
储存温度	2°C - 8°C

2.问题及解决方案

问题	原因分析	推荐解决方案
流穿中有目的蛋白	填料过载	减少上样体积或增加填料体积。
	结合时间太短	延长样品和填料的结合时间。
	标签未暴露	可以加入低浓度的变性剂，上样前透析。
	溶液中试剂不兼容	样品上样前进行透析。
洗脱组分中没有目的蛋白	目的蛋白不稳定	使用新配制的样品。低温操作。细胞裂解液中加入蛋白酶抑制剂。
	样品中无标签融合蛋白	纯化前Western检测是否有GFP标签融合蛋白
	目的蛋白表达量太低	优化蛋白表达量。增加上样量。减少NaCl浓度。
背景太杂	非特异性吸附	减少上样量，增加盐浓度。
背景太杂	洗杂不充分	增加洗杂次数，每次清洗孵育5-10min。增加洗杂液中盐离子浓度。

3.订购信息及相关产品

名称	货号	规格
Anti-DYKDDDDK Affinity Beads	SA042001	1ml
Anti-DYKDDDDK Affinity Beads	SA042005	5ml
Anti-HA Affinity Beads	SA068001	1ml
Anti-HA Affinity Beads	SA068005	5ml
Anti-GFP Affinity Beads 4FF	SA070001	1ml
Anti-GFP Affinity Beads 4FF	SA070005	5ml
Anti-c-Myc Affinity Beads	SA065001	1ml
Anti-c-Myc Affinity Beads	SA065005	5ml
Anti-RFP Affinity Beads 4FF	SA072001	1ml
Anti-RFP Affinity Beads 4FF	SA072005	5ml

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