产品介绍 10X湿转快速转膜液,即 Western Rapid Transfer Buffer (10X),是一种 10倍浓缩的安全无毒害的用于 Western 时快速转膜的缓冲液。使用前需要用适当水和乙醇稀释至 1X,本产品不含有毒有害组分,也无需使用剧毒的甲醇等试剂。使用本快速转膜液时,在 400mA 恒流下,只需约 20-30分钟,即可将聚丙烯酰胺凝胶上的蛋白转移至 PVDF 膜或硝酸纤维素膜(NC 膜)等印迹膜上,并且产热少,转膜效果突出。本产品适合手工配制的 Tris-Gly 和 Hepes 等缓冲系统的 SDS-PAGE 凝胶的转膜,也适合Tris-Gly、Hepes 和 Bis-Tris 系统等预制胶的转膜。
产品优势
① 安全便捷:不使用甲醇,避免使用毒试剂使用,配制方便;
② 快速高效:能在 20-30 分钟完成转膜过程,产热量小,减少蛋白损失;
③ 兼容性好:兼容 Tris-Gly、Hepes、Bis-Tris 系统等的手工制胶和预制胶。
运输与储存
常温运输;室温保存,保质期24 个月。
操作步骤
1. 1X 快速转膜液的配制(1L):100ml 快速转膜液(10x)+ 700ml 去离子水 + 200 毫升无水乙醇,或 100ml快速转膜液(10x)+ 690ml 去离子水 + 210 毫升 95%乙醇,充分混匀。
2. 做好转印三明治结构,然后安装到湿转槽中,设定电流恒流 400mA,转印 20-30 分钟完成蛋白转膜。
注意事项
1. PVDF 膜使用前要用甲醇润湿 30 秒以上;
2. 使用后转膜液可以回收,回收后可以再使用 1-2 次;
3. 转膜效率和蛋白大小直接相关,另外凝胶的浓度和厚度、同时使用的转膜槽数量、转膜液使用的次数、滤纸的厚度、电源功率的大小等也对转膜时长有影响。恒流 400mA 下,此产品一般 30 分钟左右即可完成转印,对于大分子量蛋白,可适当延长转膜时间(同样对小分子蛋白,可适当减少转膜时间)。
4. 如果需要同时使用 2 个或以上的转膜槽,建议使用高电流的大功率电源,或者设定较低的电流进行比较长时间的转膜。
5. 使用本产品转膜时,如果设定恒流为 400mA,无论是同一个转膜槽中 1 或 2 块胶转膜,电压在开始时比较高(最高可达 200V 左右),由于转膜过程中,转膜液温度会逐渐升高,电阻变小,所以电压会逐渐降低,结束时电压约在100-150V 之间。
6. 不推荐使用恒压转膜,因为转膜液中离子成分较多,随着温度升高电阻变小,电流会逐渐增大,有些电源无法维持转
膜所需的稳定恒压。
7. 由于用于转膜的电源品牌和型号的不同,一方面最高电流差异较大,另一方面功率也会有较大差别。有些电源会自动
降低电压或电流,有些则会报错并停止转膜。对于出现停止转膜的情况,需要调低电流,或者选择功率更大的电源。
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